慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，塑料冷冻管，从而减少冰晶对细胞的损伤常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有35L3和50L3两种。
细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶，新乡冷冻管，含10%~20%的血l清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121℃蒸气高压消毒)，2ml安瓿(或*细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。
3.1900年前后，科学家基本上肯定了生物成份能够在零下温度储存的事实。
4.二十世纪50年代，Luyet等多位学者发现了电解质浓度对储存细胞的损伤作用，他们的基本结论是。
电解质浓度增大是造成储存细胞损伤的主要原因。
5.1972年，Mazur等首先根据中国*组织培养细胞的低温保存实验数据分析，提出关于冷冻损伤的两因素假说目，即冰晶损伤和溶液损伤假说这个假说认为随着温度的下降，冰箱冷冻管，细胞内外的水分结冰，所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏并引起细胞亡。
主要技术——冻存技术：1.液氮法：目前，细胞冻存尤为常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。
细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。
采用甘油或二甲l基亚砜作保护剂，10ml冷冻管，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。
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